北京基因组所开发出新型高通量单细胞多组学技术
单细胞测序已成为生物医学领域的关键共性技术。然而，由于缺乏高效的手段降低“假单细胞率”，主流微流控平台的单通道细胞通量通常在1万细胞以下，空载率达到90%以上，且成本高昂，限制了对数百万个细胞或上千例样本的人群队列进行大规模研究。
近日，中国科学院北京基因组研究所（国家生物信息中心）蒋岚研究组基于组合标记技术路线改造优化主流微流控平台，开发了新型单细胞转录组测序技术fipresci，使细胞通量比现有技术提高十倍以上，大幅降低成本。该成果以“fipresci: droplet microfluidics based combinatorial indexing for massive-scale 5′-end single-cell rna sequencing”为题发表于《基因组生物学》（genome biology）期刊。
fipresci实验流程图 研究团队使用fpersci对人和小鼠细胞系混合物测序，获取了8000多个高质量的细胞，其中99.8%的细胞都能明确来源，表明fipersci具有很低的假单细胞率。随后，为了验证新技术对不同组织的兼容度，使用fipersci对小鼠整个e10.5胚胎的细胞进行细胞核测序，在10x genomics单通道中获取了超过10万细胞核的数据。
注释结果显示，细胞类型的成分与已发表的参考数据相似。此外，fipersci数据还可用于鉴定细胞类型和发育阶段特异的调控元件（启动子和增强子）使用偏好，发现了著名基因rbfox2在抑制性神经元发育过程中使用不同的启动子的动态变化。
进一步地，研究人员使用fipersci对来自不同癌症病人及健康人外周血中的t细胞进行单细胞rna和tcr双组学测序。数据显示，相较于健康人，癌症病人外周血中t细胞在细胞亚群组分、基因表达、tcr克隆等多个层面存在显著差异。基于小样本量的数据建模，已经足以区分癌症病人和健康人，提示低成本的fipersci技术具备基于免疫细胞信息应用于癌症液体活检及早筛方面的潜力。
综上所述，该新型单细胞测序技术可突破现有技术的设计局限，大幅提高效率并降低成本，适用于单细胞转录组和调控元件活性、免疫受体序列等多模态分析，有望有力支撑跨器官水平的大规模参考细胞图谱研究、跨时间和空间的器官发育研究、针对大规模健康人和疾病的队列细胞图谱研究、高通量crispr基因编辑和药物筛选的单细胞分子表型刻画研究等。
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