prominence nano 纳升液相色谱仪
prominence nano系列是一套纳升lc系统,可在纳升流量下进行精准流速的溶剂输送。按照应用不同,可以配置成1d和2d系统。
prominence nano具备纳升流速下的高保留时间重复性,非常低的系统死体积和极低的交叉污染等特点。
nano-assist一维lc设置图
应用
高保留时间重复性
蛋白质组分析需要比较不同样本的色谱峰差异,而样本中又存在许多特征相似的多肽,对保留时间的重复性要求非常高。prominence nano系统的高重复性可保证蛋白质组分析的高精数据,配置了rfc系统的lc-20ad nano可以在流速为300 nl/min获得rsd不超过0.2% 的保留时间重复性。
牛血清白蛋白(bsa)酶解样品的重复性
2维 lc的高分辨率
牛血清白蛋白(bsa)酶解样品的重复性
在蛋白质组学分析时,单一的1d反相分离不足以提供足够的色谱峰容量;所以,为了实现复杂样品的分离,需要进行2d分离以保证足够的峰容量。prominence nano系统可以进行2d分析,结合阳离子交换和反相模式,为蛋白质组学分析提供所需的核心技术。下图为200fmol酵母蛋白质的分析图,1d分离中的未分离组分在2d中继续分离成几个组分,2d分离的峰容量大大大于1d所获得的效果。
分析条件
1维
柱
polysulfoethyla (50mml.×1mmi.d.)
流动相
甲酸铵缓冲液
浓度step梯度
流速
40 nl/min
捕集柱
(5 mml.×300 m i.d.)
l-column (micro)
捕集时长
5分钟
脱盐溶剂
水/蚁酸=100/0.1
脱盐流速
l/min
脱盐时长
5分钟
2维
柱
picofrit (100 mml.×75 m i.d.)
流动相
梯度洗脱
a)水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v) b) 水/乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v)
流速
600nl/min
温度
温度
检测
lcms-it-tof
样本
酵母蛋白中的蛋白
(相当于200 fmol的)
分别利用1维和2维中不同类型的柱体进行其他组合的分离模式也是可行的。在这种情况下,分离或检测方法由于使用的移动相分离模式或类型之间的相互作用,可能会有一些限制。
连接maldi-tofms使用
prominence nano系统不仅仅可以通过nano esi接口连接lcms使用,还可连接到配有自动点靶仪的maldi-tofms仪器。为了准确分析maldi靶的每个色谱峰,需要lc能够在1nl到1µl范围之内精确控制流速,prominence nano系统的完全满足了此需要。
酶解bsa样品的uv色谱图(500fmol)
分析条件
检测器
uv220 nm
柱
monocap for fast-flow 快速monocap
(250 mml. × 100 µm i.d.)
流动相
1、水/乙腈/蚁酸=98/2/0.1(v/v) b) 水/乙腈/蚁酸=5/95/0.1(v/v)
2、梯度洗脱
流速
1 µl/min
温度
环境温度
捕捉柱
ods (1 mml. × 0.5 mm i.d.)
点靶间隔
12 秒的点断
每点液体:200nl(不包括基质)
lw
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